آشنایی با کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت

در این مطلب اطلاعات کاملی برای راهنمایی و آشنایی با کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت ارائه شده است.

کیت های تشخیص سریع کرونا مبتنی بر آنتی ژن و یا آنتی بادی مزایای بسیاری را برای افراد فراهم می سازند. استفاده ی سریع، آسان و کم هزینه این نوع کیت های تشخیص در هر مکان باعث می شود تا افراد آلوده به سرعت شناسایی شوند و از گسترش هرچه بیشتر ویروس کرونا جلوگیری شود.

کیت های تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت تولید شرکت دانش بنیان ماد زیست فن آور بین الملل، یکی از دقیق ترین کیت های تشخیص سریع کرونا و دارای گواهی کیفیت استاندارد اتحادیه اروپا (CE) می باشند. سیمبیوکیت در دو نوع مبتنی بر آنتی ژن و آنتی بادی تولید می شود که در ادامه به بررسی بیشتر این کیت های تشخیص کرونا پرداخته شده است.

بررسی روش انجام تست و خواندن نتایج کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت

کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت مبتنی بر آنتی ژن

کیت تشخیص سریع کرونا بر مبنای آنتی ژن با شناسایی پروتئین های مربوط به ویروس SARS-CoV-2 بیماری کرونا و حضور ویروس در بدن را در کمتر از 15 دقیقه تشخیص می دهد. از این کیت می توان در موارد متعددی از جمله در مراکز پر تردد برای شناسایی افراد بیمار، در پایان دوره ی قرنطینه بیماران برای آگاهی از امکان انتقال ویروس به دیگران، مدتی پس از در تماس بودن با فرد آلوده و یا قرارگیری در محیط های آلوده و همچنین در هر زمان و هر مکان برای برطرف سازی شک ابتلا بودن به بیماری کرونا استفاده کرد.

برای انجام این تست نیاز است تا فرد با استفاده از سواب نازال از داخل حفره بینی نمونه برداری را انجام دهد و سپس با قراردهی سواب در محلول بافر و  افزودن دو قطره از بافر  بر روی کیت، منتظر نتیجه بماند، که این مراحل در تصویر زیر مشاهده می شود.

لازم به ذکر است که انجام نمونه برداری یکی از مهمترین مراحل برای گرفتن نتیجه ی صحیح از کیت می باشد و در بسیاری از موارد دلیل پایین بودن حساسیت کیت تشخیص سریع کرونا اشتباه انجام دادن نمونه برداری توسط فرد می باشد و در برخی از کیت هابرای تشخیص بعضی از گونه های کرونا روش های نمونه برداری مشخصی معین می شود به عنوان مثال برای تشخیص گونه ی امیکرون توصیه می شود تا از یک سواب برای نمونه برداری از حلق و بینی استفاده شود و یا نمونه برداری از هر دو حفره بینی انجام شود.

هنگام قراردهی سواب نمونه برداری شده در محلول چه اتفاقی می افتد؟ نوکلئوکپسید کروناویروس (N) یک پروتئین بزرگ ساختاری است که محافظ ژنوم ویروس می باشد. هنگام قراردهی سواب در بافر تعداد بسیار زیادیاز این پروتئین در بافر آزاد می شود.

در قسمت ابتدایی کاغذ نیتروسلولز کیت، آنتی‌بادی مونوکلونالترکیب شده با طلا قرار دارد که پروتئین نوکلئوکپسید N ویروس در تماس با مونوکلونال آنتی بادی و جفت مونوکلونال آنتی بادی  با ایجاد ساختار ساندویچی، باعث بالا آمدن ذرات طلا و نمایان شدن رنگ قرمز بر روی کیت می شود و حضور ویروس را در نمونه مشخص می نماید.

در تصویر زیر این فرآیند نشان داده شده است. دایره های زردرنگ نشانگر ذرات طلا و دایره های قرمز رنگ نماینگر پروتئین ویروس می باشد که بین آنتی بادی مونوکلونال و جفت مونوکلونال آنتی بادی به صورت ساندویچی قرار گرفته اند.

نحوه خواندن نتایج تست در تصویر زیر آورده شده است.

همان طور که مشاهده می شود دو خط بر روی کیت مشخص می شود خط تست (T) و خط کنترل (C). خط کنترل نشانگر عملکرد صحیح تست است و نتیجه ی تست تنها در حالتی معتبر است که خط کنترل مشخص و قرمز شود.

دلایل مختلفی برای نمایان نشدن خط کنترل بر روی کیت وجود دارد از جمله منقضی شدن کیت که دلیل آن تمام شدن Life Time پروتئین های پوشش دهی شده می باشد و یا نقص خط تولید که در نتیجه ی آن پروتئینی بر روی کیت پوشش داده نشده است و در نتیجه کیت مورد تایید نمی باشد و باید آزمایش مجدد با استفاده از کیت دیگری انجام شود.

کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت مبتنی بر آنتی بادی

کیت تشخیص سریع کرونا بر مبنای آنتی بادی، با استفاده از نمونه ی خون فرد حضور آنتی بادی های مربوط به ویروس کرونا را در بدن فرد تشخیص می دهد.

همانند کیت تشخیص سریع مبتنی بر آنتی ژن، کیت آنتی بادی نیز موارد مصرف زیادی از جمله افراد با علامت کرونا برای تشخیص بیماری، آگاهی از امکان انتقال ویروس در پایان دوره ی قرنطینه پس از بیماری، آگاهی از سابقه ی ابتلا به ویروس کرونا را دارد و همچنین در تحقیقات و مطالعات مربوط به واکسن ها و شناخت بیماری کرونا نیز استفاده می گردد.

مراحل انجام این تست در تصویر زیر آورده شده است.

در کیت تشخیص سریع کرونا مبتنی بر آنتی بادی دو خط تست IgG و IgM وجود دارد که معمولاً anti human IgG ,IgM از خرگوش و موش تهیه می شوند و در خط کنترل نیز برای بررسی صحت کیت پروتئین نوکلئوکپسید N  قرار دارد.

در صورت وجود IgG و یا IgM کرونا در نمونه ی خون فرد، ساختاری از اتصال آنتی بادی IgG و یا IgM با نوکلئوکپسید کروناویروس (N) ترکیب شده با طلا و anti human IgG ,IgM شکل می گیرد که باعث بالا آمدن ذرات طلای ترکیب شده بر روی سطح و نمایان شدن رنگ قرمز می شود.

در خط کنترل نیز در صورت سالم بودن کیت، از ترکیب مونوکلونال آنتی بادی و پروتئین نوکلئوکپسید N کونژوگه شده با طلا و یا ترکیب آنتی بادی حیوانی و ضد حیوانی کونژوگه شده با طلا رنگ قرمز نمایان می شود. در شکل زیر می توان این مراحل را مشاهده نمود.

نحوه ی خواندن نتایج تست کیت تشخیص سریع کرونا مبتنی بر آنتی بادی در تصویر زیر آورده شده است.

مشابه با کیت تشخیص سریع مبتنی بر آنتی ژن، در این کیت نیز نتایج تست تنها در صورتی معتبر است که خط کنترل نمایان شود.

بررسی حساسیت و اختصاصیت کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت

دو پارامتر مهم در بررسی کیت های تشخیص سریع کرونا میزان حساسیت و اختصاصیت این کیت ها می باشد. حساسیت به معنای توانایی کیت برای شناسایی نتایج مثبت صحیح و اختصاصیت به معنای شناسایی صحیح نتایج منفی می باشد. سازمان بهداشت جهانی حداقل حساسیت 80% و حداقل اختصاصیت 98% را برای تعیین اعتبار کیت های تشخیص کرونا معین کرده است.

پیش از بررسی حساسیت و اختصاصیت نیاز است تا با پارامتر Ct یا Cycle threshold در تست های RT-PCR آشنا شویم. Ct تعداد سیکل هایی است که برای شناسایی ویروس در روش RT-PCR مورد نیاز است. با توجه به این مفهوم مشخص است که هر چه میزان Ct کمتر باشد، میزان ویروس در نمونه بیشتر بوده است.

بررسی های in vitro و in vivo کیت تشخیص سریع کرونا سیمبیوکیت در آزمایشگاه های مرجع غذا و داروی کشور میزان حساسیت و اختصاصیت کیت را در غلظت های مختلف ویروس معادل Ct کمتر از 25، 100% (بجز مواردی که نمونه برداری اشتباه انجام شده است) اعلام کرده است.

در ارزیابی های بالینی برای ct کمتر از ۳۵ میزان حساسیت کیت تشخیص سریع آنتی ژن 94.6% مشخص شده است. برای کیت تشخیص سریع آنتی بادی IgG و IgM حساسیت به ترتیب 95.6% و 91.6% و اختصاصیت به ترتیب 100٪ و 98٪ می باشد.